完全验证的免疫组化 (IHC) 抗体

抗体的可重现性在科学研究中的重要性

根据《Nature》的统计数据,超过70%的研究人员无法重现其他人的实验结果;超过一半的人无法重现他们自己之前的实验结果。 导致重现性差的主要因素之一是使用的试剂。 尤其是在公开数据中抗体试剂的可重复性具有重要的角色。

所有义翘神州的抗体都是自主研发和生产的,所有的验证结果也是公开的。 为了向客户提供更可靠的抗体,我们投入了大量的时间和资金进行抗体质量验证,并建立了严格的 QC 体系和各种分析方法。

完全验证的免疫组化 (IHC) 抗体

下面以 IHC 抗体为例,义翘神州完整的抗体验证步骤如下所示。

完全验证
抗原设计 多个实验对照 抗原阻断 多组织验证 批次间稳定

抗原设计

完全自主生产

• 500+ 的研发团队
• 10 年高品质试剂研发经验
• 拥有 6000+ 重组蛋白
• 五大重组蛋白生产平台

85% 真核表达

• 更接近天然结构
• 更好的生物活性
• 低内毒素:<0.1 EU / μg by LAL
• 高纯度:>95% by SDS-PAGE

多个实验对照

CD3 抗体
A: 空白对照 B: 阴性对照 C: 阳性对照

A: 空白对照: 不含一抗,确保二抗无法非特异性地结合某些细胞成分。
B: 阴性对照: 组织中不表达目标蛋白。 因此,如果您在阴性对照中看到染色,则表明这种染色是非特异性的。
C: 阳性对照: 已知表达目标蛋白的细胞系或组织。 如果阳性对照出现阴性结果,说明实验步骤有误。

抗原阻断

 

抗原阻断是指基于预先孵育一抗与免疫原以确认抗体特异性的方法。 如果抗原封闭后组织未显示染色,则证明该抗体特异性地识别您感兴趣的靶点。 但也有例外的情况,例如,当免疫原是整个蛋白时,抗体加蛋白的混合物可能会导致更强的非特异性染色,但目前尚不清楚该机制。

多组织验证

同组织多个样本验证
CD3E    
  扁桃体样本一   扁桃体样本二   扁桃体样本三
PSA    
  前列腺样本一   前列腺样本二   前列腺样本三
 
多组织类型验证
CD3E    
扁桃体   颌下腺炎   淋巴癌
     
  胸腺瘤   前列腺    

您的目标蛋白可能在不同的组织中表达,而通常在不同组织中,抗体染色结果并不完全相同。 您能用抗体检测您想要的组织中的目标蛋白吗? 这直接影响您的实验结果。 抗体供应商提供的测试组织可能与您想要研究的样本不一样。 因此,如果供应商验证更多的组织类型和样品,您可以参考更多信息,而且您的实验更有可能获得成功。

批次间稳定

严格的批次间验证,保证抗体的可重现性
CD3E    
  批次一   批次二   批次三
CD147    
  批次一   批次二   批次三
 
验证抗体的稳定性
CD3E    
刚生产不久   一年后   两年后

由于免疫动物存在不可避免的差异,不同批次的多克隆抗体在IHC染色中可能并不完全相同。 尽管单克隆抗体由相同的B淋巴细胞分泌,但细胞培养条件和抗体纯化方法的改变可能导致抗体性质的变化。 因此,无论是多克隆抗体还是单克隆抗体,批次间抗体的稳定性都非常重要。