pUC19 是小的、高拷贝数的大肠杆菌质粒克隆载体,其多克隆位点如下图所示。该分子是一个小的双链环状结构,长度为 2686 个碱基对。pUC19 编码 β-半乳糖苷酶(lacZa)的 N-末端片段,其允许蓝白斑筛选(即 α-互补)以及 pUC 复制起点。质粒适用于大多数可商购的感受态细胞,例如 TOP10,DH5α 和 TOP10F',JM109。氨苄青霉素抗性基因可用于大肠杆菌中质粒的筛选。
使用建议:用 M13-47 和 RV-M 引物扩增 cDNA ORF 序列。
说明:
全长 cDNA 序列包括 5'UTR 和 3'UTR 区域。而且 UTR 核苷酸的大小从几十到几千个碱基对不等。只显示 ORF 序列。我们强烈建议只使用基因特异性引物进行测序或 PCR 亚克隆,而不是限制性内切酶消化。
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