新冠病毒中和抗体

COVID-19大流行正以一种前所未有的方式改变着世界。自今年1月以来,全球已有超过1800万人感染了新冠病毒,并导致69.9余万人死亡。生命科学研究界正在全力研究可以预防、检测以及治疗新冠肺炎的方案。

其中,中和抗体备受科学家们的关注。中和抗体可以通过阻断新冠病毒与宿主细胞之间的相互作用来有效的控制感染。新冠病毒是通过其表面spike蛋白的受体结合域(RBD)与宿主细胞的受体ACE2结合,因此大多数中和抗体的结合靶点即为此蛋白。

义翘神州已经开发出3种针对新冠病毒spike蛋白的中和抗体,其结合活性、中和活性等均已经过结合试验、假病毒侵染试验进行验证,可用做新冠病毒中和试验的对照品。

中和抗体

中和抗体对突变体蛋白的中和效应研究

近几个月发现的新的新冠突变体毒株存在对中和抗体的逃逸潜力,比如U.K. variant B.1.1.7, Brazil variant P.1, South Africa variant B.1.351以及Indian variant B.1.617。为验证新冠突变体对中和抗体中和效应的影响,我们通过竞争ELISA法验证中和抗体(义翘神州自主研发)对重组RBD突变体蛋白的中和效力。结果发现,中和抗体对各突变株的主要突变位点的中和效应存在一定的差异, B.1.351以及P.1毒株的突变体对中和抗体存在一定的免疫逃逸潜力。

Neutralizing Antibodies WT RBD Recombinant RBD Recombinant S1
B.1.1.7 B.1.351 P.1 B.1.617 B.1.617 B.1.429
40150-D001 ++ + ++ ++ ++ ++ ++
40150-D002 ++ + + ++ ++ ++ ++
40591-MM43 ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
40592-R001 +++ +++ - - +++ +++ +++
40592-R118 +++ +++ - - + + +
40592-R117 +++ +++ - - +++ +++ +++
+: Neutralizing Capacity
如上提及的重组RBD蛋白:
WT: 40592-V08B
B.1.1.7 | U.K. Variant: 40592-V08H82 (N501Y)
B.1.351 | South Africa Variant: 40592-V08H85 (K417N, E484K, N501Y)
P.1 | Brazil Variant: 40592-V08H86 (K417T, E484K, N501Y)
B.1.617 | India Variant: 40592-V08H88 (L452R, E484Q)
如上提及的重组S1蛋白:
B.1.617 | India Variant: 40591-V08H19 (E154K, E484Q, L452R, D614G, P681R)
B.1.429 | California Variant: 40591-V08H17 (W152C, L452R, D614G)

中和活性检测 (体外中和活性试验)

中和抗体可有效抑制新冠Spike假病毒侵染ACE2过表达的HEK293T细胞。

  • S1 中和抗体 (40591-MM43)
    鼠单抗
    Conc. (µg/mL) Inhibition%
    100 96.39%
    10 94.57%
    1 42.24%
    0.1 -5.53%
    The IC50 is typically 1.41 µg/mL.
  • RBD 中和抗体 (40592-MM57)
    鼠单抗
    Conc. (µg/mL) Inhibition%
    100 95.51%
    10 93.32%
    1 75.69%
    0.1 10.11%
    The IC50 is typically 0.41 µg/mL.
  • RBD 中和抗体 (40592-R001)
    兔单抗
    Conc. (µg/mL) Inhibition%
    100 99.56%
    4 99.9%
    0.16 59.29%
    0.032 5.59%
    The IC50 is typically 0.11 µg/mL.

竞争性ELISA检测 (抑制剂筛选试剂盒试验)

新冠病毒抑制剂筛选试剂盒(货号:KIT001)ELISA竞争法检测抗体中和能力。

  • S1 中和抗体
    鼠单抗

    IC50:0.857 nM
  • RBD 中和抗体
    鼠单抗

    IC50:3.694 nM
  • RBD 中和抗体
    兔单抗

    IC50:0.59 nM

特异性检测

新冠病毒和SARS病毒的基因组拥有80%的序列相似性,这就导致了新冠病毒的抗体会不同程度的结合SARS病毒抗原。但是,这种结合反应在其他人类冠状病毒中不常见。义翘神州研发的这两株新冠中和抗体可特异性识别新冠Spike蛋白。

  • S1 中和抗体
  • RBD 中和抗体
  • ELISA检测:两株中和抗体(40591-MM43和40592-MM57)特异性识别新冠Spike蛋白,与SARS-CoV、MERS-CoV、HCoV-HKU1, HCoV-229E, HCoV-OC43,以及HCoV-NL65的Spike蛋白不结合(OD450:灰色)

亲和力检测

Octet检测新冠中和抗体(40592-R001)与新冠spike RBD蛋白 (40592-V08B-B) 的结合亲和力。